助力基孔肯雅熱病毒檢測(cè)
近期，基孔肯雅熱的出現(xiàn)再次牽動(dòng)著公眾的心。2025 年 7 月 15 日，佛山市順德區(qū)通報(bào)了一起由境外輸入引發(fā)的基孔肯雅熱本地疫情，截至 7 月 24 日，佛山全市已累計(jì)報(bào)告確診病例 3645 例?；卓涎艧嶙鳛橐环N蚊媒傳染病，其潛在的公共衛(wèi)生威脅不容小覷，需要我們給予足夠的重視和關(guān)注。
基孔肯雅熱病原學(xué)
基孔肯雅熱病毒（Chikungunya virus，CHIKV）屬于披膜病毒科甲病毒屬。病毒顆粒呈球形，直徑 60-70 nm，有包膜。其基因組為單股正鏈 RNA，全長(zhǎng)約 11.8 kb，內(nèi)含單一可讀框，依次編碼 4 種非結(jié)構(gòu)蛋白和 5 種結(jié)構(gòu)蛋白。
圖片來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)
基孔肯雅熱流行病學(xué)
基孔肯雅熱的流行呈現(xiàn)出特定的地域、人群及時(shí)間分布規(guī)律。該病毒主要分布于非洲、南亞和東南亞地區(qū)。近年來(lái)，隨著全球化進(jìn)程的不斷加快，人員流動(dòng)和貿(mào)易往來(lái)日益頻繁，基孔肯雅熱也呈現(xiàn)出向其他地區(qū)擴(kuò)散的趨勢(shì)。任何年齡人群均可感染發(fā)病，在新疫區(qū)或輸入性流行區(qū)，各年齡組人群發(fā)病無(wú)明顯差異。時(shí)間分布上，基孔肯雅熱的主要流行季節(jié)為夏、秋季；在熱帶地區(qū)，由于氣候溫暖濕潤(rùn)，適宜伊蚊生存繁殖，因此一年四季均可流行。
基孔肯雅熱傳播途徑與風(fēng)險(xiǎn)
圖片來(lái)源于云南疾控
埃及伊蚊和白紋伊蚊是基孔肯雅熱的主要傳播媒介，且蚊體內(nèi)的病毒可存活較長(zhǎng)時(shí)間，甚至終生帶毒，這大大增加了病毒傳播的可能性。
基孔肯雅熱感染的臨床癥狀
基孔肯雅熱感染的急性期主要表現(xiàn)為突然起病的寒戰(zhàn)、高熱（體溫可達(dá) 39℃ 以上），發(fā)熱持續(xù) 1-7 天，80% 的患者在發(fā)病后 2-5 天軀干、四肢、手掌和足底出現(xiàn)斑疹、丘疹或紫癜等皮疹，伴有瘙癢，數(shù)天后消退并可能輕微脫屑，同時(shí)伴有多個(gè)關(guān)節(jié)和脊椎疼痛、腫脹及全身性肌痛，極少數(shù)患者還會(huì)出現(xiàn)腦膜腦炎等嚴(yán)重并發(fā)癥。
基孔肯雅熱與登革熱異同
二者均為蚊媒傳染病，在傳播與臨床表現(xiàn)上存在諸多關(guān)聯(lián)與差異。
相同點(diǎn)：
?傳播媒介：均主要通過(guò)埃及伊蚊和白紋伊蚊叮咬傳播。
?流行區(qū)域：均主要在熱帶和亞熱帶地區(qū)高發(fā)，非洲、南亞和東南亞為核心疫區(qū)。
?初期癥狀：均以發(fā)熱、頭痛、肌肉關(guān)節(jié)疼痛為主要表現(xiàn)，且無(wú)鼻塞、流涕等上呼吸道癥狀。
不同點(diǎn)：
?病原體差異：基孔肯雅熱由基孔肯雅病毒（1 個(gè)血清型）引起，登革熱由登革病毒（4 個(gè)血清型）導(dǎo)致，且血清型間存在抗原差異。
?關(guān)節(jié)癥狀不同：基孔肯雅熱以持續(xù)性、游走性小關(guān)節(jié)劇痛為顯著特征，部分患者癥狀遷延數(shù)月至數(shù)年；登革熱關(guān)節(jié)痛較輕，多累及大關(guān)節(jié)，持續(xù)時(shí)間短。
?出血傾向有別：基孔肯雅熱出血癥狀罕見(jiàn)且輕微；登革熱 25%-50% 病例出現(xiàn)出血現(xiàn)象，嚴(yán)重時(shí)可引發(fā)休克。
?免疫特點(diǎn)各異：基孔肯雅熱感染后可獲持久免疫力；登革熱僅對(duì)同血清型產(chǎn)生持久免疫，再次感染不同血清型可能加重病情。
嚴(yán)防輸入
近年來(lái)，我國(guó)多個(gè)地區(qū)已陸續(xù)出現(xiàn)由境外輸入導(dǎo)致的本地聚集性疫情，佛山順德的疫情案例為我們敲響了警鐘。外防輸入仍是當(dāng)前防控工作的重點(diǎn)。中國(guó)疾控中心專家表示，基孔肯雅熱的傳播依賴特定蚊媒，只要做好蚊媒控制和輸入病例監(jiān)測(cè)，就能有效遏制其擴(kuò)散。與一些高致病性傳染病相比，基孔肯雅熱的致病性相對(duì)有限，不會(huì)造成類似烈性傳染病的大規(guī)模傷亡。
基孔肯雅熱病毒檢測(cè)方法
基孔肯雅熱病毒常用檢測(cè)方法主要有 3 種，病毒分離、血清學(xué)檢測(cè)和核酸檢測(cè)。通過(guò)從患者血液、血清等標(biāo)本中分離出基孔肯雅病毒，是確診的直接證據(jù)，但病毒分離培養(yǎng)周期長(zhǎng)、操作復(fù)雜。通過(guò)檢測(cè) IgM/IgG 抗體判斷病毒感染階段，但存在抗體產(chǎn)生窗口期限制，無(wú)法用于早期診斷。相比之下， RT-qPCR 核酸檢測(cè)技術(shù)憑借早期快速檢出、高靈敏度和高特異性等優(yōu)勢(shì)，能為臨床提供及時(shí)、準(zhǔn)確的診斷依據(jù)，尤其適用于早期病例篩查和疫情監(jiān)測(cè)。
產(chǎn)品推薦
全式金作為國(guó)內(nèi)優(yōu)質(zhì)分子診斷原料供應(yīng)商，擁有 19 年分子生物學(xué)產(chǎn)品研發(fā)經(jīng)驗(yàn)，深耕分子酶領(lǐng)域，提供從病毒核酸提取到檢測(cè)所需的核心原料，多年來(lái)，全式金的分子診斷原料已成功助力國(guó)內(nèi)外多家企業(yè)，為病原檢測(cè)貢獻(xiàn)力量，助力體外診斷行業(yè)發(fā)展。
1. qPCR 檢測(cè)
TransScript? II Multiplex Probe One-Step qRT-PCR SuperMix UDG（AQ322）
多重探針?lè)ㄒ徊絨RT-PCR預(yù)混液II（含UDG）
本產(chǎn)品為高靈敏度、高合成效率和高擴(kuò)增效率的一步法 qRT-PCR 擴(kuò)增試劑，高效地將 RNA 合成第一鏈 cDNA，進(jìn)行 qPCR，在同一反應(yīng)體系中一步完成從反轉(zhuǎn)錄到 qPCR 的全部反應(yīng)。
產(chǎn)品特點(diǎn)
? 操作簡(jiǎn)便，降低操作過(guò)程中的污染幾率。
? 使用 UDG 酶和 dUTP，有效防止 PCR 產(chǎn)物污染，數(shù)據(jù)準(zhǔn)確。
? 高靈敏度，高特異性，數(shù)據(jù)準(zhǔn)確。
? 適用范圍廣，已成功用于新冠病毒、流感病毒、豬瘟病毒、豬藍(lán)耳病病毒、牛病毒性腹瀉病毒、對(duì)蝦虹彩病毒、白斑病毒、桃拉病毒等檢測(cè)。
? 穩(wěn)定性好，在反復(fù)凍融、常溫、37 ℃ 等條件下保存，均可穩(wěn)定擴(kuò)增。
? 提供可凍干版本。
適用范圍
? 1~4 重 qRT-PCR 檢測(cè)。
? 高拷貝、低拷貝基因檢測(cè)。
? 高 GC 含量或具有復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)的 RNA 模板。
? RNA 病毒、微量 RNA 的檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
高靈敏度、高擴(kuò)增效率
以梯度稀釋 (5×106 copies/ml-5×102 copies/ml，10 倍稀釋 ) 的新冠病毒體外轉(zhuǎn)錄 RNA 標(biāo)準(zhǔn)品和恒定濃度 HeLa 細(xì)胞總 RNA 混合物為模板，使用 TransGen 產(chǎn)品擴(kuò)增 ORF1a、N 及 RNase P 基因 ( 內(nèi)標(biāo)基因 )。結(jié)果表明，TransGen 產(chǎn)品具有高的擴(kuò)增效率及靈敏度。
多重 PCR 檢測(cè)
以梯度稀釋 (5×106 copies/ml-5×102 copies/ml，10 倍稀釋 ) 的新冠病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒體外轉(zhuǎn)錄 RNA 和恒定濃度的人 gDNA 混合物為模板，檢測(cè) ORF1a/N 基因 ( 新型冠狀病毒 )、MP 基因 ( 甲型流感病毒 )、NP 基因 ( 乙型流感病毒 ) 和 RNase P 基因 ( 內(nèi)標(biāo)基因 )。結(jié)果表明，TransGen 產(chǎn)品可進(jìn)行四重 PCR 檢測(cè)，靈敏度可達(dá) 5×102 copies/ml。
穩(wěn)定性強(qiáng)
不同保存條件處理后，TransGen 產(chǎn)品性能不受影響，仍可穩(wěn)定擴(kuò)增。
2. 核酸提取
利用獨(dú)特的裂解液裂解病毒釋放 DNA/RNA，經(jīng)硅膠膜離心柱特異吸附，有效地純化病毒DNA/RNA。適用于從血清、血漿、全血、組織勻漿液、無(wú)細(xì)胞體液、鼻咽或口咽抽吸物或洗液、肺泡灌洗液、氣管吸出物和痰液、鼻咽或口咽拭子、培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞上清中提取病毒 DNA/RNA。
產(chǎn)品特點(diǎn)
? 操作簡(jiǎn)單。
? 提取量高，純度高。
? 提取的 DNA/RNA 適用于 PCR， RT- PCR，qPCR，qRT-PCR 等實(shí)驗(yàn)。
MagicPure? Viral DNA/RNA Kit（含 Magnetic Stand）（EC301-01）
MagicPure? Viral DNA/RNA Kit（不含 Magnetic Stand）（EC301-11）
利用獨(dú)特的裂解液裂解病毒釋放 DNA/RNA，利用硅基磁珠特異地吸附純化病毒 DNA/RNA。適用于從血漿、血清、全血、組織勻漿液、無(wú)細(xì)胞體液、鼻咽或口咽抽吸物或洗液、肺泡灌洗液、氣管吸出物和 痰液 、鼻咽或口咽拭子、培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞上清中提取病毒DNA/RNA。
產(chǎn)品特點(diǎn)
? 操作簡(jiǎn)單，無(wú)需離心，提取速度快。
? 提取量高，純度高。
? 適用于高通量磁棒式核酸提取儀。
3. 核酸自動(dòng)化提取儀
? 觸屏操控，自由編程
? 自控系統(tǒng)，安全智能
? 精確控制，高效控溫
? 紫外消毒，杜絕污染
? 結(jié)果穩(wěn)定，高效提取
產(chǎn)品列表
參考文獻(xiàn)：
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? Changing patterns of chikungunya virus: re-emergence of a zoonotic arbovirus. Journal of General Virology. 2007.
? The global distribution and burden of chikungunya. Current Opinion in Infectious Diseases. 2012.
? A single mutation in chikungunya virus affects vector specificity and epidemic potential. PLoS Pathogens. 2007.
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? The global burden of chikungunya: a systematic analysis. Lancet Infectious Diseases. 2016.
? The global distribution of the arbovirus vectors Aedes aegypti and Ae. albopictus. eLife. 2015.
? Genome microevolution of chikungunya viruses causing the Indian Ocean outbreak. Genome Research. 2006.
? Genetic and serologic analyses of chikungunya virus isolates from the Americas, Asia, and Africa. Journal of Virology. 2012.
? Chikungunya virus transmission by Aedes mosquitoes: an update. Viruses. 2018.
? The changing epidemiology of chikungunya virus: implications for control. Trends in Parasitology. 2019.
? 基孔肯雅熱診斷和治療方案.中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì). 2013.
? 基孔肯雅熱預(yù)防控制技術(shù)指南 (2012 年版). 中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì). 2012.
